紫外分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義，單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測量。一束給定波長的光通過對照物，然后再通過實(shí)際樣品溶液，就能得到吸光結(jié)果。雙光束型則是通過一個斬光輪(mirrored chopper wheel)將一束光分成兩束，分別測量對照樣品和實(shí)際樣品。可以化光漂移(lamp drift)和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y量的速度，所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處。

 

　　紫外分光光度計應(yīng)該如何校準(zhǔn)？
 

　　1、校準(zhǔn)前，應(yīng)使其開機(jī)預(yù)熱足夠時間安穩(wěn)后進(jìn)行，一般至少30min后進(jìn)行。
 

　　2、選用規(guī)范物質(zhì)時有必要注意應(yīng)在規(guī)范值的復(fù)現(xiàn)條件(即規(guī)范物質(zhì)規(guī)則的運(yùn)用條件)下進(jìn)行校準(zhǔn)，否則會產(chǎn)生錯誤的校準(zhǔn)結(jié)果。例如，運(yùn)用GBW(E)130066分光光度計規(guī)范溶液進(jìn)行校按時，有必要滿足兩個條件：
 

　　(1) 被校準(zhǔn)儀器的光譜帶寬應(yīng)該是2nm，若儀器光譜帶寬不能調(diào)理并大于2nm，則規(guī)范溶液給出的值不適用，應(yīng)該選用修正值；
 

　　(2) 校按時所選用的兩只石英比色皿應(yīng)該是內(nèi)徑(10±0.2)mm，并且在235nm、257nm、313nm、350nm處，具有很好的配對性，這樣才干復(fù)現(xiàn)規(guī)范值。
 

　　3、運(yùn)用規(guī)范溶液來校按時，還有必要特別注意校準(zhǔn)丈量時的實(shí)驗(yàn)室溫度，因?yàn)檫@些規(guī)范物質(zhì)在不同溫度下有不同的透射比規(guī)范值。
 

　　4、規(guī)范用的規(guī)范物質(zhì)有必要在說明書規(guī)則條件下保存，例如干涉濾光片應(yīng)該保在枯燥潔凈的環(huán)境中，避免表面被污染、受潮開膠或霉變等。一切規(guī)范物質(zhì)均應(yīng)在證書上注明的有效期內(nèi)運(yùn)用。
 

　　5、紫外分光光度計選用的中性濾光片規(guī)范值的不確定度一定要符合傳遞規(guī)范。校按時，要注意規(guī)范濾光片的方向性。